春季来临，春夏之交仔猪注意防疫是非常重要的，仔猪尤其是山东小猪价格非常良好，在理性平衡中变化。仔猪批发价格显得非常重要。对于价格尤其是仔猪价格我们给与优惠。

注意事项

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操作步骤
       详细操作反应体系50微升：20xBuffer 2. 5微升、dNTPs4微升（2. 5微摩尔／升）、上下游引物各2微升、MgC124微升（25微摩尔／升）、RNA模板10微升、DEPC ddH20 23. 5微升。上述试剂混匀后于70℃置5分钟，冰浴后加RT-PCR酶混合物2微升。反应程序：42℃90分钟；93℃2分钟、55℃1. 5分钟、72℃2分钟，1个循环；92. 5℃1分钟、55℃1分钟、72℃1. 5分钟，29个循环；72℃10分钟
3. RT-PCR扩增
1.根据基因文库中口蹄疫病毒VP1基因序列，通过引物设计软件分析设计引物
2.扩增引物不宜反复冻融3.操作时谨防RNA酶污染4.及时提取病料的总RNA.以防组织自溶、腐败而裂解病毒RNA
取5微升扩增产物于1. 2%琼脂糖凝胶（含0. 5微克／毫升溴化乙啶），配胶及电泳缓冲液均为1xTAE(40毫摩尔／升Tris-乙酸，1毫摩尔／升EDTA,pH8. 0),120伏电压电泳30-60分钟
4.凝胶电泳
在紫外灯下观察PCR产物在凝胶中的位置，以100bp和1kb DNA Lad.der为参照物，出现DNA条带的判定为阳性，未出现DNA条带的判定为阴性
5.结果判定
4.类症鉴别（表2-3)
表2-3 猪水疱病、猪口蹄疫、猪水疱性疹、猪水疱性口炎的鉴别试验项目猪水疱病病毒猪口蹄疫病毒猪水疱性疹病毒pH5酸处理pH3酸处理BHK-21 细胞培养Hela 细胞培养猪肾细胞培养不稳定不稳定稳定不稳定＋猪水疱性口炎病毒稳定不稳定－稳定稳定－？
山东仔猪批发已经进行了很多年形成了一种模式，山东周边的猪市场非常活跃。比如山东莒南县市场，山东仔猪临沂市场等等。仔猪价格非常稳定。

（续）

试验项目
猪水疱病病毒
猪口蹄疫病毒
猪水疱性疹病毒
猪水疱性口炎病毒
猪舌皮内感染豚鼠跖部皮内感染
乳兔感染
成年兔舌内感染2日龄乳鼠感染7~9日龄乳鼠感染
          成年鼠感染成年鸡舌内感染注：“＋”表示感染或发病死亡，“－”表示不感染或不发病，“？”表示未知。二、防治技术措施1.健康猪群防控措施（1)免疫预防1)O型灭活疫苗。此苗仅能预防猪O型口蹄疫，对其他血清型病毒无效。猪O型灭活疫苗分BEI灭活苗（普通苗）和灭活苗－II(高效苗）。

2)A型灭活疫苗。仅能预防猪的A型口蹄疫。3)合成肽疫苗。该苗是将人工合成的保护性多肽连接在载体蛋白上，加入适当的佐剂制成的疫苗。试验表明合成肽疫苗能使猪产生良好的免疫应答，抵抗口蹄疫病毒的感染。

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       （2)免疫程序 猪口蹄疫免疫程序详见表2-4.2.发病猪群防控、治疗措施（1)防控措施1)发生口蹄疫时，立即封锁、隔离、消毒并上报疫情。2)立即用血清型相同的疫苗，或高免血清对疫点及其周围的猪群进行紧急接种，建立免疫带。3)对污染场地、用具，可用2%氢氧化钠溶液、30%热草木灰水、2%甲醛溶液或强力消毒灵彻底消毒。在后一头病猪痊愈、死亡或急宰2周后，全面进行大消毒，才能解除封锁。病愈猪在3个月后，方能出封锁区。

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本文部分内容摘自“猪病防治与快速治疗技术”